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ELISA检测 | ELISA代测服务

ELISA检测是免疫检测中的一项重要技术,该法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及可自动化操作等特点。目前已广泛应用于临床检测及研究领域。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。ELISA方法也合适用于经mRNA表达谱芯片、蛋白芯片或蛋白质组学(质谱)等实验找出差异蛋白后,进一步验证差异蛋白。

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服务介绍:

ELISA检测是免疫检测中的一项重要技术,该法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及可自动化操作等特点。目前已广泛应用于临床检测及研究领域。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。ELISA方法也合适用于经mRNA表达谱芯片、蛋白芯片或蛋白质组学(质谱)等实验找出差异蛋白后,进一步验证差异蛋白。


间接法ELISA检测:用特异性抗原包被固相载体,加入待测的抗体样品反应后,再加入酶标二抗,经底物显色后测定。

夹心法ELISA检测:用第一抗原或抗体包被固相载体,加入待测的抗体或抗原反应后,再加入酶标的第二抗原或抗体,经底物显色后测定,即可计算出待测抗原的量。此方法所用抗原一般为大分子抗原,如蛋白等,不适用于多肽等半抗原。

竞争法ELISA检测:用特异性抗体包被固相载体,同时加入酶标抗原和待测抗原的混合物样本,待测抗原将与酶标抗原竞争与固相上抗体结合。经底物显色后测定,计算两组数值之差即可推出待测抗原的量。此方法常用于测定小分子抗原。

服务内容:
提供间接法ELISA检测、夹心法ELISA测定和竞争法ELISA测定。
 
样品要求:
1.客户提供含待测样品的标本(血清、血浆等),我们根据客户的需要(定性、定量)制定技术服务路线。
2.需提供待检测抗体和包被用抗原。
3.检测的样本为细胞培养上清、人和动物的血清、血浆时,样本收集后应立即-20度保存,若长期保存应-80度保存。
4.样本量的要求:若一个指标做复孔检测应不少于250ul,做单孔检测应不少于120ul。建议若客户样本量充足最好提供500ul以上。
5.客户的样本收集后,立即按要求保存,切忌反复冻融。外地客户邮寄需要用干冰运输,邮寄前请与技术支持沟通确认。

送样运输要求:
1、动植物组织样本(干冰运输):
准确称取动物组织重量按重量(mg):体积(ul)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质(推荐0.86%或0.9%的生理盐水),冰水浴条件下,机械匀浆,制备成10%的匀浆液,2500~3000转/分钟,离心10分钟,取上清液进行测定。
2、血清样本(干冰运输):
全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于2-8℃ 3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
3、血浆样本(干冰运输):
可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8℃3000转/分离心15min,取上清即可立即检测;或进行分装,并将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。解冻后的样本应再次离心,然后检测。
4、细胞样本:
贴壁细胞:将细胞用PBS冲洗2次后,用细胞刮将细胞小心刮下来,将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
悬浮细胞:将培养液3000转/分,离心10min。弃上清留细胞沉淀,干冰运输。
细胞上清:标本于2-8℃,3000转/分离心15min取上清,上清立即用于实验,或分装后于-20℃或-80℃保存。避免反复冻融。

实验流程(具体步骤以试剂盒说明书为准):
1.样本准备:血清、血浆、组织匀浆、细胞上清;
2.操作步骤:
处理样本配制标准品—加样(标准品及样本)—洗板,加检测抗体溶液,孵育—洗板,加酶溶液,孵育— 洗板,加TMB底物— 加终止液50ul,立即450nm读数(双抗夹心法)
处理样本配制标准品—加样(标准品及样本)—加酶溶液—加检测抗体— 混匀孵育— 洗板,加TMB显色— 加终止液50ul,立即450nm读数(竞争法)
3.实验结果:有样本OD值代入标曲中计算出浓度,结果以EXCEL形式发出。

实验结果展示:

ELISA检测(代测),350元/次/96T