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多糖多酚复杂植物RNA提取试剂盒(离心柱型)

Complex Plant RNA Extraction Kit(Column)

包装规格：

本产品仅用于科研，禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍：
多糖多酚复杂植物RNA提取试剂盒，适用于复杂中草药如石斛、丹参、雪莲、人参等；复杂淀粉种子如水稻、小麦、玉米种子等；复杂果实如葡萄、蓝莓、草莓、西瓜果实等；复杂抗逆植物如冬青、松针、沙棘、胡杨等；复杂花卉如月季、玫瑰、梅、牡丹花等；复杂多糖植物如紫菜、仙人掌、芦荟等植物的RNA提取。可在25分钟左右，无需使用苯酚、氯仿等有机试剂，采用独特的裂解液可以迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，结合高效的gDNA过滤技术，可高效去除基因组DNA，纯化得到的RNA几乎不含DNA污染。

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点：
无污染：整套试剂盒采用RNase-Free处理。
特殊性：适用于提取多糖多酚，复杂植物组织的总RNA。
易操作：操作简便，提取过程仅需 25分钟左右。 
安全性：无需使用苯酚、氯仿等有机试剂。
吸附柱：含有特异性吸附柱。通过漂洗－离心－洗脱的步骤提取。
高质量：有效保证RNA的完整性，回收RNA 效率高，纯度高，没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2，可用于各种分子生物学实验。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 
样品处理：
取 50~100 mg植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入1ml裂解液PLB（已添加β-巯基乙醇），涡旋剧烈震荡混匀。注意：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。（依据样品需求，可将β-巯基乙醇至终浓度提高至10~20%。如果是特别复杂植物样品，可尝试在裂解液中加入PVP40至终浓度2%。）

提取步骤：
1.65°C水浴5~10分钟，中间偶尔颠倒1~2次帮助裂解。
2.将裂解物13,000 rpm离心10分钟，会有杂质沉淀。
3.将上清液转入新的离心管中，加入0.5倍上清体积的无水乙醇，立即吹打混匀。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能会黏附在枪头的外壁，注意不能将其带入离心管中。）
4.将混合溶液（每次小于750μl，可分两次加入）转入套有基因组清除柱的离心管中，13,000 rpm离心1分钟，弃掉废液。
5.将基因组DNA清除柱放入新的2ml离心管内，加入500μl裂解液RPS，13,000 rpm离心30秒， 收集滤液（RNA在滤液中），加入0.5倍滤液体积的无水乙醇，立即吹打混匀。
6.将混合溶液（每次小于750μl，可分两次加入）转入套有吸附柱RA的离心管中，13,000 rpm离心1分钟，弃掉废液。
7.加700μl Buffer RW1，室温放置1分钟，13,000rpm 离心30秒，弃掉废液。
8.加入700μl Buffer RW（请先检查是否已加入无水乙醇），13,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
9.再次加入500μl Buffer RW（请先检查是否已加入无水乙醇），13,000 rpm离心3分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。 
10.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase-free离心管中，在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl RNase-free H2O室温静置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

取50mg样品柑橘内皮组织提取RNA

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