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TRI LS Reagent(液体样品总RNA抽提试剂)

TRI LS Reagent(液体样品总RNA抽提试剂),适用于多种属液体样品总RNA的提取,适用范围广,样品可来源于人、动物、植物、酵母、细菌、病毒、血清、血浆、全血、体液等;提取完整性好。TRI LS和液体样品的终体积比是3:1,TRzol LS (液体样本RNA抽提试剂)可以用于后续的RT-PCR、Northern blot分析dot杂交及体外转录等实验。

产品编号:2107

产品规格:50ml/100ml

产品价格:500/900

包装:

储存条件:4℃

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TRI LS Reagent(液体样品总RNA抽提试剂)| TRIZOL LS Reagent

TRI Liquid Sample Total RNA Extraction Kit(TRIzol LS Reagent)


包装规格:

2107A TRI LS Reagent液体样品总RNA抽提试剂(TRIzol LS Reagent) 50 mL 500元
2107B TRI LS Reagent液体样品总RNA抽提试剂(TRIzol LS Reagent) 100 mL 900元
2107C TRI LS Reagent液体样品总RNA抽提试剂(TRIzol LS Reagent) 5×100mL 4050元


本产品仅用于科研,禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍:
TRI LS Reagent液体样品总RNA抽提试剂,能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。适用于人,动植物,酵母,细菌和病毒的液体样品中提取总RNA的试剂。也可以从动物组织、 植物材料、 各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。在加入氯仿离心后,会分成三层,RNA 分布在上清水相层。收集上清水相后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。
可直接用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点:
无污染:整套试剂盒采用RNase-Free处理。
适用广:适用于动物组织,植物组织,各种微生物和培养细胞等各类样品材料的RNA提取。
特殊性:适用于提取液体样品的总RNA。
易操作:操作简便,提取过程仅需 30 分钟左右。 
吸附柱:含有特异性吸附柱。通过漂洗-离心-洗脱的步骤提取。
高质量:有效保证RNA的完整性,回收RNA 效率高,纯度高,没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2,可用于各种分子生物学实验。

操作步骤:(实验前请先阅读注意事项) 
样品处理:
1.生物液体:每250μl液体样品(血清,血浆,脑脊液等)加入750μl TRI LS Reagent,用移液器吹打混匀样品,裂解样品中细胞。每5~10×106 个细胞至少加入750μl TRI LS Reagent。确保TRI LS Reagent和样品的体积比总是3:1。
2.动物组织:取新鲜或-80°C冻存动物组织尽量剪碎,每50~100mg组织加入750μl TRI LS Reagent,匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入750μl TRI LS Reagent混匀。如果组织样品的体积小于250μl,加入灭菌水将组织样品体积调整到250μl。确保TRI LS Reagent和样品的体积比总是3:1。
3.植物组织:取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在TRI LS Reagent中迅速研磨,每50~100mg组织加入750μl TRI LS Reagent,如果组织样品的体积小于250μl,加入灭菌水将组织样品体积调整到250μl。确保TRI LS Reagent和样品的体积比总是3:1。
4.贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,按培养板面积每10cm2加入300~400μl TRI LS Reagent,用移液器吹打混匀,直到看不到明显的细胞团为止。裂解液加入量不足会有DNA污染。
5.悬浮细胞:离心收集细胞。每5 ~ 10×106动物、植物和酵母细胞或每1×107细菌细胞加入750μl TRI LS Reagent混匀。如果悬浮细胞液的体积小于250μl,加入灭菌水将组织样品体积调整到250μl。确保TRI LS Reagent和样品的体积比总是3:1。用移液器吹打混匀,直到看不到明显的细胞团为止。不需要洗涤,避免mRNA降解。

提取步骤:
1.将匀浆样品剧烈震荡后,室温静置5分钟以使核蛋白体完全解离。
2.可选步骤: 在4°C的条件下以12,000 rpm的离心力离心10分钟,取上清。(当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要额外的分离步骤。)
3.每750μl TRI LS Reagent加200μl氯仿。盖紧管盖,剧烈震荡15秒并将其在室温静置3分钟。
4.在4°C 12,000rpm 离心10分钟,样品会分成三层:下层有机相,中间层和上清水相层,RNA存在于上清水相层中。
5.将上清水相转移到新的离心管中,加入等体积异丙醇。 颠倒混匀后室温静置10分钟。(不要吸取沉淀物和漂浮物。漂浮物可能会黏附在枪头的外壁,注意不能将其带入离心管中。)
6.4°C 12,000 rpm 离心10分钟,弃上清,此时在管壁或管底形成胶装沉淀。
7.加入75%乙醇洗涤沉淀。每使用750μl TRI LS Reagent用1ml 75%乙醇对沉淀进行震动涡旋洗涤。
8.在室温或者4°C 12,000 rpm离心3分钟,弃上清,注意不要吸取RNA沉淀。剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸取沉淀。
9.室温静置2 ~ 3分钟。加入30 ~ 100μl RNase-free H2O,充分溶解RNA,得到的RNA保存在-80°C,防止降解。

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2. 专业的引物设计技能,保证qPCR引物的特异性;

3. 熟练的qPCR操作技能,保证完美的qPCR结果;

qPCR实验流程图

送样要求:

1. 细胞(≥106 )、新鲜动植物组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA或总RNA(总RNA>2μg,体积≥20μl,浓度≥100 ng/μl)。
2. 靶基因信息和背景资料:基因序列或GenBank Accession Number等,生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、DNA/RNA 来源、基因丰度等。

提供服务:
引物探针设计合成,RNA提取,反转录,RNA电泳,引物筛选,上机定量检测。

提交结果:
原始数据(CT值和各种统计值,融化温度图,扩增曲线图,电泳图,柱状图)、数据分析结果及详细实验报告。