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TRI全血(液体样本)总RNA提取试剂盒(离心柱型)

TRI Blood/Liquid Sample Total RNA Extraction Kit(Column)

包装规格：

本产品仅用于科研，禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍：
TRI全血(液体样本)总RNA提取试剂盒，适用于各种液体样本的RNA提取。裂解液RLS可以高效裂解液体中的细胞，灭活RNA酶；结合特异性的吸附柱，即可提取无蛋白、基因组、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点：
无污染：整套试剂盒采用RNase-Free处理。 
特殊性：适用于提取血液样品等液体样品总RNA。
易操作：操作简便，提取过程仅需 30 分钟左右。 
吸附柱：含有特异性吸附柱。通过漂洗－离心－洗脱的步骤提取。
高质量：有效保证RNA的完整性，回收RNA 效率高，纯度高，没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2，可用于各种分子生物学实验。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 
样品处理：
1.液体样品：每250μl液体样品（血清，血浆，脑脊液等等）加入750μl 裂解液RLS，用移液器吹打混匀样品，裂解样品中细胞。每5~10×10⁶ 个细胞至少加入750μl 裂解液RLS。确保裂解液RLS和样品的体积比总是3：1。
2.贴壁细胞：直接在培养板中加入裂解液裂解细胞，按培养板面积每10cm²加入300~400μl裂解液RLS，用取样器吹打混匀。用移液器反复吹打，直到看不到明显的细胞团为止。裂解液加入量不足会有DNA污染。
3.悬浮细胞：离心收集细胞。每5~10×106动物、植物和酵母细胞或每1×107细菌细胞加入750μl裂解液RLS混匀。如果悬浮细胞液的体积小于250μl，加入灭菌水将组织样品体积调整到250μl。确保裂解液RLS和样品的体积比总是3：1。用移液器反复吹打，直到看不到明显的细胞团为止。不需要洗涤，避免mRNA降解。

提取步骤：
1.将匀浆样品剧烈震荡后，室温静置5分钟以使核蛋白体完全解离。
2.每750μl 裂解液RLS加200μl氯仿。剧烈震荡15秒并将其在室温下静置3分钟。
3.4°C 12,000rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上清水相，RNA存在于上清水相中。把上清水相转移到新管中（不要触碰中间层）。
4.加入上清水相等体积的70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇），可能会出现沉淀，立即吹打混匀。将混合溶液转入套有收集管的吸附柱RA中。12,000rpm 离心45秒，弃废液。
5.加500μl 去蛋白液RE，12,000rpm 离心45秒，弃废液。
6.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm 离心45秒，弃掉废液。
7.重复步骤6一次。
8.将吸附柱RA放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
9.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase - free离心管中，在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl RNase-free H2O室温静置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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