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新鲜全血细胞总RNA提取试剂盒(离心柱型)

Fresh Blood Cell Total RNA Extraction Kit(Column)

包装规格：

本产品仅用于科研，禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍：
超纯全血总RNA提取试剂盒，适用于血液RNA提取。优先去除红细胞，避免过多的杂质污染，再进行裂解；结合特异性的吸附柱，即可提取无蛋白、基因组、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点：
无污染：整套试剂盒采用RNase-Free处理。 
特殊性：适用于提取血液样品的总RNA。
易操作：操作简便，提取过程仅需 30 分钟左右。 
吸附柱：含有特异性吸附柱。通过漂洗－离心－洗脱的步骤提取。
高质量：有效保证RNA的完整性，回收RNA 效率高，纯度高，没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2，可用于各种分子生物学实验。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 
1.在适合大小的RNase free离心管中加入1倍体积（ 0.5~1.0ml）含有抗凝剂的新鲜血液样本和3倍体积的红细胞裂解液RLB颠倒混匀。
2.室温放置10分钟（期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞）。如果RNA降解严重，可在冰上裂解，但要适当延长裂解时间。
3.12,000 rpm离心20秒，倒弃红色上清，留下完整的管底白细胞团，小心的尽可能多的吸弃上清（注意不要吸到管底的细胞团）。如果看到的是大部分的红色细胞团，说明红细胞裂解很不充分，应该再加入红细胞裂解液RLB重悬细胞团后重复步骤2，3。
4.加入1ml的裂解液RL，涡旋震荡，重悬混匀，在室温条件下静置5分钟以使核蛋白体完全分解。
5.每1ml裂解液RL加200μl氯仿。盖紧管盖，剧烈振荡15秒并室温下放置2分钟。
6.在4°C 12,000rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上清水相，RNA存在于上清水相中。把上清水相转移到新管中（不要触碰中间层）。
7.加入上清水相等体积的70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇），可能会出现沉淀，立即吹打混匀。将混合溶液转入套有收集管的吸附柱RA中。12，000rpm 离心45秒，弃掉废液。
8.加500μl 去蛋白液RE，12，000rpm 离心45秒，弃掉废液。
9.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm 离心45秒，弃掉废液。
10.重复步骤9一次。
11.将吸附柱RA放回收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
12.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase - free离心管中，在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl RNase - free H2O室温静置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。