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新鲜全血RNA提取试剂盒(离心柱型,Safe)

Fresh Blood RNA Extraction Kit(Column)

包装规格：

本产品仅用于科研，禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍：
全血RNA提取试剂盒，适用于血液RNA提取。含有红细胞裂解液优先去除血液样品的红细胞，避免过多的杂质污染， 在进行裂解；结合特异性的吸附柱，无需使用苯酚、氯仿等有机试剂，即可提取无蛋白、基因组、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点：
无污染：整套试剂盒采用RNase-Free处理。 
特殊性：适用于提取血液样品等液体样品的总RNA。
易操作：操作简便，提取过程仅需 40 分钟左右。 
安全性：无需使用苯酚、氯仿等有机试剂。
吸附柱：含有特异性吸附柱。通过漂洗－离心－洗脱的步骤提取。
高质量：有效保证RNA的完整性，回收RNA 效率高，纯度高，没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2，可用于各种分子生物学实验。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
1.在适合大小的RNase free离心管中加入1倍体积（0.5~1.0ml）含有抗凝剂的新鲜血液样本和3倍体积的1x红细胞裂解液RLB（请先检查是否稀释到1x）颠倒混匀。
2.室温放置10分钟（期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞）。如果RNA降解严重，可在冰上裂解，但要适当延长裂解时间。
3.12,000 rpm离心20秒，倒弃红色上清，留下完整的管底白细胞团，小心的尽可能多的吸弃上清（注意不要吸到管底的细胞团）。如果看到的是大部分的红色细胞团，说明红细胞裂解不充分，应该再加入红细胞裂解液RLB重悬细胞团后重复步骤2，3。
4.加入350μl（<0.5 ml全血）或者600μl（0.5~1.5ml全血）裂解液RLT涡旋或者轻弹管壁将白细胞沉淀完全松散重悬，吹打混匀后用手剧烈振荡20秒，充分裂解。或者按照350μl（<2×106白细胞）或者600μl（2×10⁶ ~ 1×10⁷白细胞）的样品量添加裂解液RTL。可用移液器混合匀浆。
5.估计匀浆液体积，加入等体积的70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇），可能会出现沉淀，立即吹打混匀。
6.将混合溶液（每次小于700μl）滴入套有吸附柱RA的离心管中，13,000 rpm离心60秒，弃掉废液。
7.加700μl 去蛋白液RW1，室温放置1分钟，12，000rpm 离心30秒，弃掉废液。
8.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
9.重复步骤8一次。
10.将吸附柱RA放回收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase - free离心管中，在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl RNase-free H2O室温静置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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