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常温等温扩增产品 介绍：点击进入

Basic	Basic常温恒温DNA快速扩增酶，用于DNA扩增，电泳检测
Exo	Exo常温恒温DNA快速扩增酶，用于DNA扩增，荧光检测
nfo	nfo常温恒温DNA快速扩增酶，用于DNA扩增，试纸条检测
RT-Basic	RT-Basic常温恒温RNA快速扩增酶，用于RNA扩增，电泳检测
RT-Exo	RT-Exo常温恒温RNA快速扩增酶，用于RNA扩增，荧光检测
RT-nfo	RT-nfo常温恒温RNA快速扩增酶(核酸试纸条型)，用于RNA扩增，试纸条检测
LFD	一次性核酸检测试纸条/可视化核酸检测试纸条/横向流动试纸条LFD

RPA是什么？

基本原理:
重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，最佳反应温度在37°C左右。

重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA）技术，在恒温37-42℃条件下，模拟体内核酸复制机制，由各种蛋白酶参与，帮助DNA聚合酶复制DNA，以实现DNA的等温扩增，反应产物以指数级增长，整个反应一般在20-30min内获得可以检测水平的产品。

重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应形成并启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增。被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。在这个体系中，由两个相对的引物起始一个合成事件。整个过程进行得非常快，一般可在十分钟之内获得可检出水平的扩增产物。

Isothermal amplified detection of DNA and RNA

 

本技术平台开发的试剂盒具有较高的灵敏度，特异性，操作简单，速度快，非常适合现场快速基因检测用途，该技术可以广泛应用于农业，林业，牧业，水产等领域的基因检测、体外诊断、个性化用药，遗传分析，疾病诊断、流行病学监测、食品安全检测、生物安全检测、病原微生物检测、转基因检测，动物源性成分检测，药用植物真伪鉴定等领域。还可以用于急性传染病和常见病原体流行病感染的早期分子诊断，有助于疾病的早期治疗和防控，尤其是在经济欠发达的地区，野外现场基因检测，以及流行病爆发现场快速检测鉴定。

引物设计:
RPA分析的关键在于扩增引物和探针的设计。PCR引物多半是不适用的，因为RPA引物比一般PCR引物长，通常需要达到30-38个碱基。引物过短会降低重组率，影响扩增速度和检测灵敏度。在设计RPA引物时，变性温度不再是影响扩增引物的关键因素。RPA的引物和探针设计不像传统PCR那样成熟，用户需要自己摸条件进行优化。

优势:
常规PCR必须经过变性、退火、延伸三个步骤，而PCR仪本质上就是一个控制温度升降的设备。RPA反应的最适温度在37℃-42℃之间，无需变性，在常温下即可进行。这无疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要温控设备，RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。

据介绍，RPA检测的灵敏度很高，能够将痕量的核酸（尤其是DNA）模板扩增到可以检出的水平，从单个模板分子得到大约1012扩增产物。而且RPA还用不着复杂的样品处理，适用于无法提取核酸的实地检测。

技术优势及特点：

1. 对简单样品，如全血，唾液，脱落细胞，游离细胞等，37-42℃恒温扩增15-20min即可完成核酸扩增和检测。对于复杂样品需进行样品前处理，加上核酸扩增及检测，整个过程也不超过30分钟。而常规检测方法都是现场采集，再长途运输到专业实验室，最后还需专业人员检测3-5小时。

2. 可以广泛应用于农业，林业，牧业，水产等领域的基因检测、体外诊断、个性化用药，遗传分析，疾病诊断、流行病学监测、食品安全检测、生物安全检测、病原微生物检测、转基因检测，动物源性成分检测，药用植物真伪鉴定等领域。

3. 检测的灵敏度很高，能够将痕量的核酸模板扩增到可以检出的水平，从单个模板分子得到大约10¹²扩增产物。而且不需要复杂的样品处理，适用于无法提取核酸的实地检测。

4. 此技术既可以扩增DNA也可以扩增RNA，还省去了额外的cDNA合成步骤。不仅可以对扩增产物进行终点检测（凝胶电泳检测），还可以对扩增过程进行实时监控（实时荧光定量检测，速度最快！15-20min扩增检测出结果），甚至可以通过试纸条（侧流层析试纸条）读取结果。