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Super ibac P DNA杆状病毒DNA

包装规格：

产品简介：

通过对杆状病毒DNA的复制必需基因进行修改，使其不能在昆虫细胞中正常复制，只有和对应的转移载体同源重组，修复其复制必需基因，才能在昆虫细胞中进行复制，只有当Super ibac DNA和携带目的基因的转移载体pIAT成功同源重组后，才能在昆虫细胞中复制存活，因此共转染昆虫细胞后无需任何筛选，重组率为100%，一步法转染，简单快速，尤其经过基因改造后，重组蛋白更稳定,蛋白生物活性更高。

Super ibac P DNA专门开发用于表达蛋白生产病毒颗粒（virus-like particle,  VLP），也适用于胞质蛋白的表达。该系统细胞在极晚期才裂解，因此可延长重组蛋白细胞内加工组装成VLP的时间，从而提高VLP的产量。本试剂盒提供双启动子转移载体pIAT2可同时表达多个外源蛋白。

运输及保存条件:  

低温运输，-20℃保存。

产品规格及组分：

使用方法：

共转染昆虫细胞生产重组杆状病毒实验操作流程：

1.    接种细胞：将生长对数期的sf9细胞计数， 将1 x 10⁶ Sf9 细胞铺均匀种于35mm平皿中，静置至少1小时；

下一步操作之前观察细胞确保细胞达到近汇合细胞单层。

2.    准备共转染质粒：取0.1mL无血清无抗生素细胞培养基到1.5mL EP管中，加入100ng super iBac DNA （5uL）和500ng 转移质粒pIAT（5uL），轻轻混匀。加入适量转染试剂，如5uL Lipofectin，混匀，室温静置20分钟，以形成脂质体-DNA混合物。

3.    移去培养皿中1mL培养基，若细胞培养基中有血清，则用1mL无血清培养基洗涤细胞两遍，最后加入1mL无血清培养基，注意，培养皿中留取1mL的培养基。

4.    立即将混匀的0.1mL DNA+脂质体混合液，轻轻加入到细胞培养皿中间，28℃培养箱温育5-24小时。

5.    取出培养皿加入1mL新鲜细胞培养基（可以是10％血清培养基，也可根据需要加入抗生素），继续28℃培养箱培养至5天。

6.    离心，收获平皿中的培养液上清，放入无菌管中，作为重组病毒种子。 重组病毒种子可以长期保存于-80℃，也可短时间保存于4℃。

昆虫杆状病毒表达系统BEVS介绍

      昆虫杆状病毒表达系统（Baculovirus Expression Vector System－BEVS）  广泛应用于科研和工业生产领域。与其他常用的重组蛋白表达系统相比，昆虫杆状病毒表达系统具有外源基因表达水平高、易于表达异源多聚体蛋白、安全性等优势，表达的重组蛋白通常具有正确的翻译后修饰和生物学活性，如二硫键的形成、磷酸化、糖基化等等。同时昆虫细胞悬浮生长，容易放大培养，有利于大规模表达重组蛋白。

      Genenode君诺德公司，国内独家提供自产的第二代昆虫杆状病毒表达产品Super ibac，包括杆状病毒DNA（Super ibac DNA），转移载体(pIAT)，对照转移载体(pIAT GFP)和Super ibac DNA Kit。相较于其他类似产品，我们价格更优惠，供货更迅速，同时还可以提供更快速、高效、经济的昆虫杆状病毒表达重组蛋白服务，自主研发生产的杆状病毒表达试剂盒可以达到更高的重组蛋白表达水平，经验丰富的技术人员能够为您推荐最适合的服务，迅速解决在表达纯化过程中遇到的问题。

技术原理:

Super iBac系统是一个全新的生产重组杆状病毒的技术平台，免去了从亲代病毒中筛选重组病毒的步骤，不需要进行空斑实验，一步法杆状病毒蛋白表达系统，是目前最领先的杆状病毒表达系统。

通过对杆状病毒DNA的复制必需基因进行修改，使其不能在昆虫细胞中正常复制，只有和对应的转移载体同源重组，修复其复制必需基因，才能在昆虫细胞中进行复制，只有当Super ibac DNA和携带目的基因的转移载体pIAT成功同源重组后，才能在昆虫细胞中复制存活，因此共转染昆虫细胞后无需任何筛选，重组率为100%，一步法转染，简单快速，尤其经过基因改造后，重组蛋白更稳定,蛋白生物活性更高，适合分泌蛋白，膜蛋白，毒性蛋白等难表达的蛋白。

第二代昆虫杆状病毒表达系统技术特点:

1.重组蛋白表达水平高（最高可达细胞总蛋白的50%），大多数为有生物功能的可溶性蛋白；

2.真核表达系统，重组蛋白生物学活性高，能同时表达多个外源基因；

3.可进行翻译后修饰:磷酸化修饰, 形成正确折叠的二硫键, 进行N-和O-型糖基化修饰

4.表达人源化蛋白，昆虫细胞中糖基化途径克服人源糖蛋白的问题。

5.大多数昆虫细胞系在不加血清培养基中快速生长，得到高滴度病毒和高产量重组蛋白；

6.相对于其他真核表达系统成本较低，硬件设施成本低接近于原核表达，无需CO2培养箱，无需血清培养基；

7.规模化培养简单经济，适合自动化生产，昆虫细胞比哺乳动物细胞操作简单；

8.商业化的BEVS系统让病毒重组及蛋白表达变得更简单；

 不同蛋白表达系统的比较：

不同杆状病毒表达系统介绍（BEVS）

转染GFP基因：

杆状病毒宿主细胞：

杆状病毒DNA的选择：

产品线（具体请询价）：