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无血清细胞冻存液

简单/安全/高效，无需液氮，低温冰箱直接冻存

特别配方有效提高细胞冻存存活率和复苏活力。不含血清，不含动物来源蛋白，能减少各类病毒，霉菌和支原体等的污染，确保冻存细胞安全。通用于各种动物细胞株，既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。操作简便，直接放入-70℃以下冰箱长期保存。

冻存方法比较：

产品特色与优势：

1.不含血清和动物来源的蛋白，安全稳定

（1）降低了动物血清来源病毒，霉菌和支原体等污染的风险，确保冻存细胞的安全。

（2）对于已适应了无血清培养的细胞来说，避免了血清的带入和细胞生长状态的改变（如悬浮培养细胞恢复贴壁状态）。

（3）动物血清成分复杂，个体差异大，且生产来源不稳定，因此批次间质量常常不稳定，影响培养细胞的状态，无血清冻存液成分和配比明确，批次间几乎无差异，能够保证生长细胞状态的稳定。

2.即用型，方便快捷，无需液氮，无需分步降温，只需要加入无血清细胞冻存液，即可长期保存，冻存和复苏操作，安全简单。

3.低温冰箱长期保存，对冻存设备要求低，对冻存管的要求低，普通材质的螺口管即可，安全可靠，只需-70-80℃冰箱，对设备要求低。

4.整块细胞培养板冻存，省时高效：

对于用细胞培养板培养的细胞，例如杂交瘤筛选过程，如果想要暂时保存整板克隆，只需直接弃去整板培养液，加入适量快速冻存液，密封培养板边缘，再置于-80℃冰箱即可，复苏时直接将培养板置37℃培养箱解冻后换新鲜培养基即可恢复培养，细胞状态几乎不受影响。适合各种型号细胞培养板（如96孔，48孔，6孔，平皿等）。

保存条件：

储存于4℃以下，质保期3年。3个月以上没有使用冻存液计划时，尽可能冷冻保存。为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低，推荐将100 ml产品分装小瓶后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。

细胞冷冻保存方法：

选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。

1.按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。

2.按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。

（参考：5×105至5×106cells/ml）。

3.取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min）。移去离心管中的上清液。

4.加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。

5.将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。

6.直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃冰箱，长期冷冻保存。

7.若研究者需要液氮保存时，可将完全冻结的冻存管（放入-80℃冰箱后至少一昼夜）移至-196℃液氮罐。

冻存细胞复苏方法：

1.从冰箱里取出细胞冷冻保存管，立即放入37℃振动水浴槽中快速解冻。

2.待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1 ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合，再将细胞混合液从冻存管中移入含有9 ml该细胞培养基的试管中，混合均匀。

3.离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000 rpm，4℃，3~5 min），移去上清液。

4.清洗细胞，充分洗净残留冻存液。

5.加入适量的新鲜细胞培养基，使用移液管缓缓地均匀细胞混合液。适量地稀释后，将细胞混合液移至事先准备好的培养瓶中。

6.镜检后，研究者可根据各自方法和需要来进行细胞培养。