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抗体纯化

我公司可为客户提供多种抗体纯化服务: 一、硫酸铵纯化 二、Protein A/G纯化 三、抗原亲和纯化

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制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将直接影响试验的成败。多克隆血清中含有复杂多样的抗体,它不仅含有针对免疫原产生的抗体,还有血清的全部抗体,此外还含有许多自身的血清蛋白。为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要对抗体进行纯化处理。


纯化抗体的用途之一是降低非特异性本底,能去除引起实验误差的污染蛋白,且能精确控制实验中产生阳性信号的抗体量, 因此纯化抗体可以作为所有免疫化学实验中降低本底的基本手段。另外,使用纯化抗体还能进行抗体标记(减少有时使用标记二抗带来的干扰),或用于制备免疫亲和纯化柱等。

抗体纯化的方法包括DEAE离子交换色谱法、硫酸铵沉淀法及其他方法,其中蛋白G或蛋白A亲和柱法纯化较为简单、高效,抗原亲和柱法纯化则能获得针对抗原的特异性抗体。

我公司可为客户提供多种抗体纯化服务:

一、Protein A/G纯化

二、抗原亲和纯化

三、硫酸铵纯化

产品名称

时间

Protein A亲和纯化

3-5

Protein G亲和纯化

3-5

IgM型单抗纯化

3-5

多肽/抗原亲和纯化

3-5


一、抗体纯化(ProteinA/G法)

服务内容:
1.Protein A/G 纯化(≤50 ml)
2.紫外吸收法测定抗体浓度
3.纯化抗体Elisa

最终交付的材料:纯化后抗体;SDS-PAGE抗体纯度鉴定报告;ELISA检测报告;完整实验报告。

样品要求:抗血清,0.2mg 抗原
备注:
1.蛋白A或蛋白G是细菌胞壁蛋白,它们能结合抗体Fc段,这一结合非常牢固,但其亲和力对pH的变化敏感,抗体/蛋白A或蛋白G的亲和力随PH值的降低而急剧降低,因而可用于纯化不同来源的抗体和抗体亚型。
2.在抗血清中免疫球蛋白IgG的含量为8-12 mg/ml,只占血清中总蛋白含量的10%左右。蛋白A/G纯化抗体的得率大约为5-10 mg总IgG/ml 抗血清;

二、抗体纯化(抗原亲和纯化法)
服务内容:
1.抗原亲和纯化(≤50 ml)
2.紫外吸收法测定抗体浓度
3.纯化抗体Elisa

最终交付的材料:纯化后抗体;SDS-PAGE抗体纯度鉴定报告;ELISA检测报告;完整实验报告。

样品要求:抗血清,2-5 mg 抗原
如果抗原是多肽,须提供多肽2 mg,纯度大于80%,若为多肽溶液则浓度须大于2 mg/ml;如果抗原是蛋白,该蛋白在PBS中应当可溶,须提供蛋白5 mg,纯度大于80%,浓度大于0.5 mg/ml

备注:
1. 抗原与抗体之间具有高度的亲和力和特异性,能够分离抗特定抗原的特异性抗体,并且具有高收率、高纯度、高特异性等优点,常用于从多克隆抗体中纯化抗原特异性抗体。



三、抗体纯化(硫酸铵沉淀法)

服务内容:

1.硫酸铵沉淀法纯化血清(≤50 ml)
2.紫外吸收法测定抗体浓度
3.纯化抗体Elisa

最终交付的材料:纯化后抗体;SDS-PAGE抗体纯度鉴定报告;ELISA检测报告;完整实验报告。

样品要求:抗血清,0.2 mg 抗原
备注:
1.饱和硫酸铵可以在偏酸的条件下沉淀血清或者腹水中除 IgG外的蛋白质, 使上清液中只含有 IgG, 所以该法一般用来纯化 IgG1 和 IgG2b, 可用于多种动物血清及小鼠腹水中抗体及单克隆抗体的纯化。
2. 饱和硫酸铵纯化抗体的得率大约为10 mg蛋白/1 ml 抗血清;