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Western Blot

Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。

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Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。


与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。

经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。

服务内容: 
1. 从细胞、人或动物组织、细菌、植物、血清等样品中提取蛋白 
2. 对蛋白进行定性及定量分析 
3. Western blot检测 :
     (1) 电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品 
     (2) 湿法转印 
     (3) 杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白
     (4) 化学发光检测(ECL),胶片曝光,ImageJ软件读取灰度值(可选) 
4. 预实验及正式实验:帮助客户设计样品上样顺序 
5. 免费进行胞浆蛋白内参检测(胞核蛋白内参需收取费用) 

送样要求:
1. 细胞>1×107,组织>50mg,细菌湿重>50mg,植物>100mg,血清>50ul;
2. 样品蛋白浓度>1mg/ml,蛋白量>200ug/样品;
3. 客户提供材料:新鲜或正确保存的样品,目的蛋白一抗,阳性对照样品,相关文献;

提交结果 :
1、预实验曝光结果(胶片及扫描图),预实验采取2个一抗稀释度; 
2、正式实验曝光结果(胶片及扫描图) ;

3、完整实验报告 。


收费方式:

蛋白提取费用:50元/样本,1200元/目的蛋白/膜(8-9个样本,预实验,二抗和内参免费,一抗代购或客户提供,常用抗体我们有备货,只收取稍许抗体费用)。