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酵母蛋白表达与纯化服务

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毕赤酵母蛋白表达系统是重组蛋白表达服务平台的重要组成,与其它表达系统相比,毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。我们可提供基因序列优化,多载体选择构建,多种菌株转化,大规模发酵等服务,可交付可溶性表达的高纯度蛋白。


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服务特点:

1.自主研发的密码子分析软件,可根据密码子偏爱性,对目的基因进行优化,有效提高蛋白产量和可溶性;

2.制定灵活的表达载体构建方案,主要采用有利于目的蛋白纯化积累的分泌型表达载体;

3.可依据客户要求提供各种宿主菌株;

4.确定培养基及诱导条件(菌体密度,甲醇浓度,诱导时间等),提高目标蛋白的表达量;

5.通过离子交换、透析超滤、凝胶过滤、亲和层析等方法对目的蛋白进行精细的分离纯化;

6.可根据客户需求提供纯化标签切除,内毒素控制去除等服务。

 

服务项目:

1.目的基因合成及优化

2.构建阳性重组质粒

3.PCR筛选高拷贝表达菌株

4.酵母蛋白诱导表达条件摸索

5.重组蛋白分离纯化

6.SDS-PAGE、Western blotting检测

 

服务流程:

服务内容

交付内容

实验周期

目的基因合成及密码子优化
目的基因的亚克隆
构建线性化表达质粒

测序报告
重组表达质粒

2-3周

线性化载体和电转化入毕赤酵母
PCR鉴定筛选高拷贝表达菌株

PCR鉴定筛选报告

2-3周

表达条件的优化

蛋白诱导表达并优化表达条件
目的蛋白分离纯化及检测

表达菌株
纯度>85%
1~10mg纯化蛋白,保证蛋白恢复天然构象
QC报告(SDS-PAGE,Western Blot)

3-4周