技术服务

一、服务介绍：

Southern印迹杂交（Southern blot）是1975年由英国人southern创建，是研究DNA图谱的基本技术，在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。

Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量。

本公司使用最先进的自动化学发光成像检测系统进行曝光，确保捕获最佳信噪比的成像时间点，获得较高质量的图片，图片可以直接用于SCI论文发表使用，达到国际期刊的要求。 

  本公司的Southern杂交技术可以检测各种动物植物 微生物的基因组片段，探针的制作使用DIG（地高辛）标记，具有标记效率高，背景噪音少、无放射性污染的特点。本公司在实验过程中保留原始数据，原始照片和实验材料，数据真实可信，具有可重复性。

服务流程：
1.基因组DNA提取（单独收费）
2.探针设计合成（单独收费）
3.DIG探针标记
4.Southern杂交检测
5. 提交给您电子版检测报告，包括详细操作程序和实验结果等

二、服务报价：

Southern Blot检测，如果重复2次实验仍结果不理想（背景深等），将收取5000元/膜的基础费用。
重复杂交，如果重复2次实验仍结果不理想（背景深等），将收取3000元/膜的基础费用。

三、客户提供材料：

1.用于实验，Southern杂交的高质量DNA样品质量至关重要，决定实验的结果的成败。建议委托本公司提取，以便于提高效率节省时间。

2.基因组DNA检测：OD260/OD280=1.8-2.0，基因组要求DNA总量不小于60ug，浓度大于500ng/uL；客户需要提供基因组DNA检测图片以及NANO Drop 2000等检测仪的检测结果，要求无降解，无蛋白污染，电泳检测标准请参考。

3.检测样品低温运输至公司，最可靠选择干冰，顺风快递运输。

4.客户需提供用于杂交的目标基因序列和含有待杂交基因的阳性质粒（50uL以上），我们会依据Southern blot实验要求重新选择全长或部分区域作为探针序列，标记地高辛探针。

5.客户如果无法提供高品质的，达到实验要求的基因组DNA样品，本公司可以帮助制备可用于Southern Blot检测的DNA样品，客户需要提供足够量的组织样品，细胞样品或者菌液样品（建议干冰顺丰快递运输）。

6.客户需要选择合适的DNA内切酶将基因组DNA片段化，即弥散化结果。如果实验需要用到非常规的限制性内切酶或者需要本公司进行选择，需额外加收酶切费用和设计费用，并且客户需提供 实验中用到的一系列基因序列信息。 

四、实验流程:

1.制备待测DNA

2.DNA限制酶消化 

3.琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品 

4.电泳凝胶预处理

5.转膜

6.探针标记 

7.预杂交

8.Southern杂交

9.洗膜

10.放射性自显影检测 

11.实验结果分析及报告

五、提供结果:

本公司负责对客户提供样品进行DIG探针标记与Southern杂交检测技术服务，最终提供检测报告及检测图片。

1、DNA样品检测报告（实验样品不返还，请注意保留备份）

2、标准实验流程报告

3、southern blot实验结果检测报告

4、如果是实验有额外的要求，请提前致电或邮件进行沟通说明。