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尿液基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)

尿液中DNA来自于尿道中脱落的细胞,用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点:1)尿液收集物是非介入、无创伤性的。2)从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。本产品就是专门用于从尿液中提取基因组DNA的产品,提取的DNA可直接用于PCR反应。本产品具有下列特点:

产品编号:D2529

产品规格:50T/200T

产品价格:660/2120

包装:

储存条件:4℃

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尿液基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)

Urine DNA Extraction Kit(Column)


包装规格:

D2529-50 尿液基因组DNA提取试剂盒(离心柱型) 50次 660元
D2529-200 尿液基因组DNA提取试剂盒(离心柱型) 200次 2120元


一.产品介绍:
    尿液中DNA来自于尿道中脱落的细胞,用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点:1)尿液收集物是非介入、无创伤性的。2)从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。本产品就是专门用于从尿液中提取基因组DNA的产品,提取的DNA可直接用于PCR反应。本产品具有下列特点: 

二.产品特点:
1.操作简单,整个过程室温操作约20分钟,适合大规模样品处理。 
2.DNA产率女性一般为50-200 ng/mL尿液,男性一般为3-50 ng/mL尿液。 
3.所提取的DNA纯净,可直接用于PCR、DNA甲基化鉴定、癌症检测等。 
4.安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。 
5.性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。

三.储存条件:
1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入1毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性,因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存,-20℃保存。
3.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

四.注意事项:
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.需要自备异丙醇。
3.开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

五.操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
   提示:第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1.取5-50 ml尿液,放入适当大小离心管,3,000 rpm离心收集细胞沉淀。


2.小心弃上清,加入200μl缓冲液UB重悬细胞。


3.加入20μl蛋白酶K (20mg/ml)溶液,充分混匀,再加入200μl结合液CB,立刻涡旋振荡充分混匀,在70℃放置10分钟。溶液应变清亮。

     
4.冷却后加入100μl 异丙醇,立刻涡旋振荡充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。
上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。


5.将上一步混合物(包括可能有的沉淀)加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。


6.加入500μl抑制物去除液IR,12,000 rpm 离心30秒,弃废液。 


7.加入500μl漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。


8.加入500μl漂洗液WB,12,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。


9.将吸附柱AC放回空收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。


10.取出吸附柱AC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加30μl洗脱缓冲液EB(洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中预热效果更好), 室温放置3-5分钟,12,000 rpm 离心1分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温放置2分钟,12,000 rpm离心1分钟。
洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但最小体积不应少于15μl,体积过小降低DNA洗脱效率,减少DNA产量。


11.DNA可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。



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