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通用植物RNA提取试剂盒(离心柱型,DNase I)

Universal Plant RNA Extraction Kit with DNase I(Column)

包装规格：

本产品仅用于科研，禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍：
通用植物RNA提取试剂盒(DNase I)，适用于水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。可在40分钟左右，无需使用苯酚、氯仿等有机试剂，采用独特的裂解液可以迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，结合DNase Ⅰ可直接在柱上消化样品中残留DNA。可提取没有蛋白、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。 

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点：
无污染：整套试剂盒采用RNase-Free处理。
特殊性：适用于提取植物组织的总RNA。
易操作：操作简便，提取过程仅需 40分钟左右。 
安全性：无需使用苯酚、氯仿等有机试剂。
吸附柱：含有特异性吸附柱。通过漂洗－离心－洗脱的步骤提取。
高质量：有效保证RNA的完整性，回收RNA 效率高，纯度高，没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2，可用于各种分子生物学实验。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 
样品处理：
取 50~100 mg植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末，加入1ml裂解液PRA，涡旋剧烈震荡混匀。注意：由于植物多样性非常丰富，而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的RNA 含量都不相同，请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。

提取步骤：
（可依照实验需求提前制备DNase I工作液，每一个样品取45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I在离心管轻轻吹打混匀成工作液，可按照样品数量按比例制备工作液。）
1.将匀浆裂解液剧烈震动15~20秒，13,000rpm离心5~10分钟。会有杂质沉淀。
2.将上清液转入新的离心管中，加0.5倍体积的无水乙醇，立即吹打混匀。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能会黏附在枪头的外壁，注意不能将其带入离心管中。）
3.将混合溶液（每次小于720μl）转入套有吸附柱RA的离心管中，13,000 rpm离心2分钟，弃掉废液。
4.加350μl 去蛋白液RW1，室温放置1分钟，13,000rpm 离心30秒，弃掉废液。
5.向吸附柱RA 膜中央加入50μl 的DNase I 工作液（45μl DNase I buffer和5μl RNase-free DNase I），室温下放置15 分钟。
6.加入350μl去蛋白液RW1， 12,000 rpm 离心30秒 ，弃废液。
7.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），13,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
8.重复步骤7一次。
9.将吸附柱RA放回收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase-free离心管中，在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl  RNase-free H2O室温静置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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