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纤维类组织RNA提取试剂盒(离心柱型)

Fibrous tissue RNA Extraction Kit(Column)

包装规格：

本产品仅用于科研，禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍：
纤维类组织RNA提取试剂盒，适用于心脏、骨骼肌、血管、气管、皮肤和其它纤维丰富的组织的RNA提取。可在30分钟左右，无需使用苯酚、氯仿等有机试剂，采用独特的裂解液可以迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，结合多次柱漂洗的方式，可提取没有蛋白、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。 

可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点：
无污染：整套试剂盒采用RNase-Free处理。
特殊性：使用针对纤维丰富组织RNA提取的改良试剂。
易操作：操作简便，提取过程仅需 30分钟左右。 
安全性：无需使用苯酚、氯仿等有机试剂。
吸附柱：含有特异性吸附柱。通过漂洗－离心－洗脱的步骤提取。
高质量：有效保证RNA的完整性，回收RNA 效率高，纯度高，没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2，可用于各种分子生物学实验。

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项） 
样品处理：
1.量取10~20mg（<30mg）新鲜组织或－80°C冻存组织放入离心管中，加入300μl裂解液RLT（已添加β-巯基乙醇）。使用匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入合适裂解液RLT混匀。必要时，用带钝针头的一次性 1 ml注射器（配0.9mm针头）抽打裂解物。
2.吸取590μl RNase-free H2O至匀浆中。加入10μl蛋白酶K，移液器吹打混匀。

提取步骤：
1.55°C水浴10分钟。室温下13，000rpm离心5分钟。会有杂质沉淀。
2.将上清液转入新的离心管中，加入0.5倍上清液体积的无水乙醇，立即吹打混匀。（不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能会黏附在枪头的外壁，注意不能将其带入离心管中。）
3.将混合溶液（每次小于700μl，可分两次加入）转入套有吸附柱RA的离心管中，13,000 rpm离心1分钟，弃掉废液。
4.加700μl 去蛋白液RW1，室温放置30秒，12，000rpm 离心30秒，弃掉废液。
5.加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
6.重复步骤5一遍。
7.将吸附柱RA放回收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8.取出吸附柱RA（避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液），放入新的RNase-free离心管中，在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl RNase-free H2O室温静置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后，将RNA溶液保存在－80°C，防止降解。

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