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RNAfixer 无液氮RNA样品储存液

RNAfixer 是一种水相的,无毒的组织保存液体,可以迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中,在非冻状态下原位稳定和保护细胞内的RNA。取下组织薄片后立刻浸入RNAfixer保存并不影响将来提取RNA的质量和数量。RNAfixer消除了RNA样品需要立刻处理或者必须液氮保存的不方便。浸入RNAfixer后,新鲜组织细胞中RNA可以完好的在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存。RNA 病毒样品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一个月。

产品编号:2126

产品规格:50ml/100ml

产品价格:336/550

包装:

储存条件:4℃

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RNAfixer 无液氮RNA样品储存液
无需液氮,运输方便,操作容易,样品25℃运输一周不影响RNA提取


一.产品介绍:
RNAfixer 是一种水相的,无毒的组织保存液体,可以迅速渗入新鲜组织细胞的胞浆中,在非冻状态下原位稳定和保护细胞内的RNA。取下组织薄片后立刻浸入RNAfixer保存并不影响将来提取RNA的质量和数量。RNAfixer消除了RNA样品需要立刻处理或者必须液氮保存的不方便。浸入RNAfixer后,新鲜组织细胞中RNA可以完好的在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一个月, 在-20℃或-80℃下长期保存。RNA 病毒样品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一个月。
RNAfixer

二.适用范围:
适用于动物组织(心,肝,肾,肌肉,睾丸,脑,脾等)、培养细胞、RNA 病毒、果蝇、细菌、白细胞、全血、一些植物组织等。

三.储存条件:
透明液体, 室温(18-25℃)保存期限为12 个月,如果使用时发现有沉淀或者析出,可以在37℃加热重新溶解后使用,不影响产品质量。

四.产品特点: 
1.操作容易:将组织剪成适当大小,浸没在RNAfixer中即可使其RNA不被降解。
2.无需液氮:使样品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱, 尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.方便运输:处理过的样品能在25℃保存一周, 使样品邮寄和运输变得容易和便宜, 有利学术合作和交流。
4.多次冻融: 经RNAfixer处理的样品可反复冻融多次, 其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA 的质量。
5.可比性强: RNAfixer能减少大规模样品处理中的误差, 增加各次实验数间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
6.兼容性广: 多种总RNA提取试剂都可以用来提取保存在RNAfixer内的样品。还可直接用于组织切片, 免疫学和流式细胞分析而不影响RNA 提取的质量。

五.使用方法:
RNAfixer只用于新鲜组织,浸泡入RNAfixer前禁止冷冻组织。只需要迅速将新鲜组织剪成长,宽,高任意一边厚度<0.5厘米浸泡入RNAfixer即可(只要有一边厚度不超过0.5厘米,RNAfixer可以迅速渗透,其它两边的尺寸并不重要)。将新鲜组织浸泡在5倍体积的RNAfixer中,按照指示存放在适当的温度。



1.动物组织:RNAfixer并不破坏或者溶解组织结构,因此浸泡在RNAfixer中达到渗透平衡的组织可以从RNAfixer中取出,然后切成更小的块,然后放回到RNAfixer中下次继续使用。小器官如小鼠肝,肾,和脾不需要剪切,可以完整的存放在RNAfixer中。


2.植物组织:很多植物组织直接浸泡入RNAfixer即可,有的植物有天然渗透屏障如腊质保护层,需要先破坏掉腊质层,便于RNAfixer渗透。


3.组织培养细胞:细胞吹打下来后,离心收集细胞,弃上清,用冰浴的PBS缓冲液洗一次去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中。加入五到十倍体积RNAfixer, 混均。


4.血和血浆:和红细胞和血清分离的白细胞可以和组织培养细胞一样的保存。RNAfixer也可以保存抗凝全血,血清和血浆。对于全血加入3倍体积RNAfixer,混匀。


5.酵母:离心收集3X108的细胞(>12,000g离心两分钟),立刻将细胞团重悬在0.5–1 ml 的RNAfixer中。酵母细胞可以保存在RNAfixer中25℃8小时或者4℃一个星期。如果要保存存更长时间,将酵母细胞在RNAfixer中放置一个小时后, 再次于>12,000g离心5分钟,将酵母细胞团放入液氮瞬时冷冻后放置于–80℃储存。


6.细菌:细菌并不能在RNAfixer 中生长,但是RNAfixer并不破坏细菌,E. coli在4℃ 保存一个月仍旧可以提出完整的RNA。

六.RNAfixer中样本的存放:
1.存放在–80℃:建库样品长期保存用。将RNAfixer中样本放置于4℃过夜,然后将样本捞出,尽量去除干净RNAfixer液体,然后放置于–80℃. 对于组织培养细胞,则不需要去除RNAfixer,直接冷冻于–80℃,并不会裂解细胞。样品使用时可以在室温融化,并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。

2.存放在–20℃:将RNAfixer中样本放置于4℃过夜,然后转移到–20℃。在–20℃样品并不会被冰冻,但是可能会形成一些结晶,这并不会影响将来的RNA提取。样品使用时可以在室温融化,并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。

3.存放在4℃:样本可以在4℃存放一个月。

4.存放于25℃:存放于25℃样本的RNA在一周内保持完整,保存两周的样品RNA有轻微降解,勉强能用于northern analysis, 但是质量足够用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis。

5.存放于37℃:存放于37℃样本的RNA在24小时内保持完整,3天的时候有部分降解。

七.RNAfixer保存样本的RNA提取:
将样本从RNAfixer中取出,RNAfixer可以直接倒入水池,用自来水冲即可,不需特殊处理。

1. 组织:用干净镊子将样品从RNAfixer中捞出,用吸水纸吸去残留的RNAfixer后,和新鲜组织一样用液氮研磨,然后用Trizol(货号:2101B)匀浆处理提取RNA。

2. 细胞:对于存储在RNAfixer中的细胞有两种选择,一是从细胞和RNAfixer混合物中加10倍体积Trizol(货号:2101B)直接提取,另一种方法是离心沉淀细胞,去除RNAfixer后用Trizol(货号:2101B)提取RNA。

a. 去除RNAfixer后提取RNA:存放于RNAfixer中的细胞变得不那么脆弱,可以承受较高的离心速度而不被裂解。我们有在5000g离心成功收集细胞的经验, 由于每种细胞的强度不一样, 可以先用不重要的细胞做个预试验,以保证在使用的速度下离心不会破坏细胞。另一个选择是在离心前加等体积的PBS稀释RNAfixer和细胞的混合物,以减少溶液的密度,使细胞溶液可以沉淀下来。

b. 不去除RNAfixer,直接提取RNA:也可以直接加10倍体积的一步法提取试剂(如TRIpure,TRI reagent)到细胞和RNAfixer的混合物,然后按照正常步骤操作。

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2. 专业的引物设计技能,保证qPCR引物的特异性;

3. 熟练的qPCR操作技能,保证完美的qPCR结果;

qPCR实验流程图

送样要求:

1. 细胞(≥106 )、新鲜动植物组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA或总RNA(总RNA>2μg,体积≥20μl,浓度≥100 ng/μl)。
2. 靶基因信息和背景资料:基因序列或GenBank Accession Number等,生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、DNA/RNA 来源、基因丰度等。

提供服务:
引物探针设计合成,RNA提取,反转录,RNA电泳,引物筛选,上机定量检测。

提交结果:
原始数据(CT值和各种统计值,融化温度图,扩增曲线图,电泳图,柱状图)、数据分析结果及详细实验报告。



RNA提取产品选择指南:

样品类别 编号 产品用途及优势
动物组织细胞 2101B RNASure Reagent:质量和效果同进口Trizol,价格最实惠
2102B 超纯总RNA快速提取试剂盒:质量同T公司DP419,Trizol+离心柱,速度更快,纯度更高,操作更简单,价格实惠
2103B 组织/细胞RNA快速提取试剂盒:质量同Q公司74104,无需酚/氯仿抽提,速度最快,有少量DNA残留,需加DNA酶消化
2104B EASY组织/细胞RNA快速提取试剂盒:同Q公司74134,无需酚/氯仿抽提,不用DNA酶消化,无DNA残留,15min提取的RNA可直接做qPCR 
血液样品 2107B TRI LS Reagent:液体样品RNA提取试剂,不用离心柱纯度差一点,对操作技术要求高,可用于新鲜血样的保存运输,之后再用2108B全血(液体样本)快速总RNA提取试剂盒提取RNA
2108B 全血(液体样本)快速总RNA提取试剂盒:用于-80℃冷冻抗凝全血总RNA提取,也可用于新鲜血样或2107B TRI LS Reagent保存运输的样品RNA提取
2109B 超纯全血总RNA快速提取试剂盒:新鲜全血总RNA提取重点推荐产品,RNA纯度高,操作简单
2110B EASY全血RNA快速提取试剂盒:同Q公司52304,无需酚/氯仿抽提,有少量DNA残留,需加DNA酶消化
2111A RNAstore Blood RNA Kit:仅用于保存在RNAfixer中常温或4℃运输后的抗凝全血RNA提取,提取产量高,纯度好
2112A PAXgene Blood RNA Kit:同BD 762165,集静脉采血、稳定核酸、提取纯化RNA一体,可常温运输保存
普通植物组织 2101B RNASure Reagent:质量和效果同进口Trizol,价格最实惠
2113B 通用植物总RNA快速提取试剂盒:可用于普通植物组织细胞RNA提取,Trizol+离心柱型,速度更快,纯度更高,操作更简单
多酚多糖植物组织 2114B 植物RNA快速提取试剂盒:质量同Q公司74904,无需酚/氯仿抽提,速度最快,操作简单,不带DNA酶柱上消化,适合做普通的反转录和克隆
2115B EASY植物RNA快速提取试剂盒:无需酚/氯仿抽提,操作简单,带DNA酶柱上消化步骤来清除残留DNA,提取的RNA可以做qPCR
2116A EASY通用植物RNA提取试剂盒:质量同T公司DP432,无需酚/氯仿抽提,速度最快,操作最简单,带DNA酶柱上消化,提取的RNA可以做qPCR
2117A EASY多糖多酚/复杂植物RNA提取试剂盒:可以解决复杂多糖多酚,色素淀粉含量大,其他公司产品提取失败或产量低的复杂植物样品
纤维丰富组织 2118B 纤维类组织RNA快速提取试剂盒:效果同Q公司74704,适合心脏、骨骼肌、血管、气管、食管、眼球、皮肤、耳朵等纤维含量丰富的组织总RNA提取,使用Dnase I去除残留的基因组DNA
细菌样品 2119B 细菌RNA快速提取试剂盒:不用苯酚,氯仿毒性物质,快速简单
2120B EASY细菌RNA快速提取试剂盒:不用苯酚,氯仿毒性物质,快速简单,无DNA残留
真菌样品 2121B EASY真菌RNA快速提取试剂盒:无需酚/氯仿抽提,操作简单,带DNA酶柱上消化步骤来清除残留DNA,提取的RNA可以做qPCR
酵母样品 2122B 酵母RNA快速提取试剂盒:不用苯酚,氯仿毒性物质,快速简单
病毒样品 2123A 病毒RNA快速提取试剂盒:无需酚/氯仿抽提,RNA 纯度高,质量可靠,可用于PCR/RT-PCR等下游实验
2124A 病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒:无需酚/氯仿抽提,RNA 纯度高,质量可靠,可用于各种下游实验
RNA样品储存液 2126B RNAfixer 无液氮RNA样品储存液:同RNAlater,稳定和保护未冷冻样本中的RNA完整性
DNA消化试剂 2127A Dnase I 柱上消化试剂盒:快速消化硅胶膜上残留的DNA,无需实验后单独清除残留的DNA
2128A Dnase I 快速DNA消化试剂盒:对RNA中残留的DNA进行消化后用于反转录荧光定量PCR
RNA保护试剂 2129A RNA长期保存液:RNA 样品运输和中长期保存的最佳选择,可4℃过夜保存或-20℃保存至少1年
2130A Rnase抑制剂:用来保护RNA免受Rnase降解,用于RT等下游实验
RNA纯化试剂 2131B RNA清洁纯化试剂盒:纯化的总RNA 没有蛋白的污染,所得的RNA 可用于多种下游实验。