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DNA测序

由于ddNTP无法与后续的dNTP形成磷酸二酯键,从而使正在扩增的DNA链终止延伸。若在DNA扩增体系中加入带有不同荧光的四种ddNTP(ddATP,ddGTP,ddCTP,ddGTP) 在一定时间后就会形成一组长度递减(递增)一个碱基且带有四种不同荧光标记的DNA片断。通过电泳可以区分长度不同的DNA片断,通过识别四种不同的荧光来读出四种不同的碱基,从而测定DNA序列。

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由于ddNTP无法与后续的dNTP形成磷酸二酯键,从而使正在扩增的DNA链终止延伸。若在DNA扩增体系中加入带有不同荧光的四种ddNTP(ddATP,ddGTP,ddCTP,ddGTP) 在一定时间后就会形成一组长度递减(递增)一个碱基且带有四种不同荧光标记的DNA片断。通过电泳可以区分长度不同的DNA片断,通过识别四种不同的荧光来读出四种不同的碱基,从而测定DNA序列。


测序引物要求:
1.引物长度最好在20bp左右;
2.不能含有特殊结构;
3.引物浓度要≥5P。

客户需要提供:
1.提前准备送测样本,以便节约取样时间;
2.请详细填写测序样本登记表。以便及时与您沟通。
(测序样品登记表详见下载区)

我们提供的服务:
1.接收菌株、质粒、PCR样本。
2.PCR、质粒样本次日出结果,菌株隔日出结果。
3.免费提供引物设计及建议,拼接序列,引物单独收费;

特别说明:
1.菌株:新鲜菌液易于培养,可以获得更多的DNA,同时更大限度保证菌种的纯度。
a.需过夜培养的菌液:提供的量不少于200ul;
b.无需培养的菌液:提供的量不少于3~4ml(已培养好的);
c.长途运输尽量提供穿刺菌;
d.暂不接收酵母菌。

2.质粒:
a.请务必溶于灭菌的双蒸水中。(不要溶于TE中);
b.检测浓度大于100ng/ul浓度;不少于10ul以上。(1~2个反应)。

3.PCR产物:
a.已纯化的PCR请务必溶于灭菌的双蒸水中,不少于10ul以上。(1~2个反应);
b.未纯化的PCR不少于20ul(单一条带),需切胶回收的样本不少于40ul,且在订单中注明。