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实时荧光定量PCR检测

RNA提取,反转录,实时荧光定量PCR检测,相对定量:包括RNA提取、反转录和扩增,采用SYBR Green I法和TaqMan探针法两种方式,一般采用2-ΔΔ Ct法进行计算。每个样本重复三次,一般情况我公司提供内参基因引物。

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技术服务表单实时荧光定量PCR服务表单 


荧光定量PCR技术是通过荧光染料或荧光标记的特异性探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时监控反应过程。随着PCR 反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,结合相应的软件对产物进行分析,可以得到荧光扩增曲线,计算待测样品初始模版的量。

 
实时荧光定量PCR技术是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。君诺德生物基于多年的经验,可以提供mRNA 表达量水平检测、microRNA 表达量水平检测和基因拷贝数检测。实验的方法可分为SYBR Green I 法和TaqMan探针法,测定灵敏、特异性强,易于使用。


qPCR实验流程:

服务项目:
1.相对定量:

对待测样品进行某一特定基因的检测并确定待测基因相对于某一特定管家基因以及该基因在实验组中相对于对照组的相对表达情况。参考基因和靶基因表达分析,包括RNA提取、反转录和扩增,采用SYBR Green I法和TaqMan探针法两种方式,一般采用2-ΔΔ Ct法进行计算。每个样本重复三次,一般情况我公司提供内参基因引物。

检测服务包括:mRNA,miRNA,lncRNA,circRNA,端粒检测


2.绝对定量:

对待测样品进行某一特定基因的检测并确定样本中基因的拷贝数。需要制备标准品并建立标准曲线,然后检测目的样本中的基因,比对标准曲线得到基因准确拷贝数,标准品制备单独收费。DNA(RNA) 的绝对定量分析; 转基因拷贝数测定; 病毒和病原量化


3.  定性分析: 

对待测样品进行某一特定基因的检测。检测病毒; 检测转基因; 确定品种; 突变基因分型


4.  单核苷酸多态性分析(终点法): 人类疾病分析; 个性化医疗; 单核苷酸多态性分析:Taqman-MGB,KASP
 
送样要求:
1. 细胞(≥106 )、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA或总RNA(体积≥20μl,浓度≥100 ng/μl)。

2. 靶基因信息:包括基因序列或GenBank Accession Number 等;背景资料:包括生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、DNA/RNA 来源、基因丰度等。

 
提交结果:
引物和探针及序列,反转录胶图,原始数据、数据分析结果及实验报告。 同时提供待测基因序列或基因名称。


收费方式:(全国范围诚招技术服务代理商和兼职)

服务内容
收费方式 优惠价 时间
RNA提取/样品
35-120元/样品
具体项目报价

1-2天

大量样品

时间延长

反转录/样品            30元/样品 免费
                引物设计与实验验证
          100-200元/对
免费
      qPCR(三次重复SYBR Green I法)
       90-200元/样品/基因
具体项目报价
2-3天
具体服务价格,根据不同qPCR方法,待检测样品数量,基因数量决定的,具体请询








常用网站:

1. NCBI:https://www.ncbi.nlm.nih.gov

2. DDBJ:https://www.ddbj.nig.ac.jp

3. EMBL-EBI:https://www.ebi.ac.uk

4. UCSC:http://genome.ucsc.edu

5. qPCR Primer Database:https://biodb.swu.edu.cn/qprimerdb

6. The real-time PCR primer and probe database:http://www.rtprimerdb.org

7. PrimerBank:https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank 

8. miRBase:http://www.mirbase.org/