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快捷型植物基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
本试剂盒采用独特的缓冲液系统,特别适合从植物干粉或者新鲜植物材料中提取基因组DNA。无需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制,实验者可根据自己的需求灵活调整。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。
产品编号:D2515
产品规格:50T/100T/200T
产品价格:260/460/840
包装:盒
储存条件:4℃
快捷型植物基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
Quick Plant DNA Isolation Kit(Solution)
包装规格:
D2515-50 | 快捷型植物基因组DNA提取试剂盒(溶液型) | 50次 | 260元 |
D2515-100 | 快捷型植物基因组DNA提取试剂盒(溶液型) | 100次 | 460元 |
D2515-200 | 快捷型植物基因组DNA提取试剂盒(溶液型) | 200次 | 840元 |
一.产品介绍:
本试剂盒采用独特的缓冲液系统,特别适合从植物干粉或者新鲜植物材料中提取基因组DNA。无需酚/氯仿抽提,使用安全方便,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。对样品的起始重量没有限制,实验者可根据自己的需求灵活调整。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA 可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。
二.产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂。
2.快速,简捷,操作整个过程可在1个小时内完成。
结果稳定,产量高(比离心柱型的产量高一倍以上),OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达50Kb-150kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。
三.储存条件:
1.缓冲液AP1、AP2低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃-65℃水浴几分钟帮助重新溶解,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
四.注意事项:
1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.用户需自备异丙醇、70%乙醇、液氮研钵、水浴箱。
3.开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4.本试剂盒为溶液型,可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的量,请联系我们索取其它处理量的操作手册。
五.操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
1.取适量植物组织(新鲜组织100 mg 或干重组织20 mg)在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。
2.转移细粉到一个1.5ml离心管,不要解冻,加入400μl缓冲液AP1 和4μl RNase A(10 mg/ml),旋涡振荡,充分混匀帮助裂解。
如果组织裂解困难,可根据需要加一个轻柔匀浆10秒的步骤帮助裂解。大多数情况下不需要离心去除未完全裂解的组织,因为后面有一个离心去除的步骤。
3.65℃水浴10分钟,在水浴过程中颠倒离心管2-3次,混合样品。
4.加入130 μl 缓冲液AP2,充分混匀,冰上放置5分钟, 14,000 rpm 离心5 分钟,小心吸取上清到一个新的1.5ml离心管,注意不要吸到界面物质。
5.可选步骤:将上清液再次14,000 rpm (~13,400×g )离心5 分钟,小心缓慢吸取上清到一个新的1.5ml离心管中,不要吸到沉淀。
此步骤目的为去除上清液中的沉淀杂质,使提取基因组DNA 纯度更高。
6.加入0.7体积的室温异丙醇(例如500μl的上清液加350μl 异丙醇),颠倒30次混匀或者直到出现棉絮状(丝状)白色DNA沉淀。
7.12,000rpm离心2分钟,在管底可以见到白色的DNA沉淀块,倒弃上清。
8.加入1ml 70%乙醇,颠倒几次漂洗DNA沉淀,12,000rpm离心1分钟, 倒去上清(注意不要把DNA沉淀倒掉了),倒置后在吸水纸上轻敲几下以控干残留乙醇,还可以用枪头小心吸掉管底沉淀周围和管壁的残留乙醇,空气晾干沉淀几分钟。
注意不要干燥过头,否则DNA极其难溶;也不能残留太多乙醇,否则乙醇可能抑制下游如酶切反应。
9.加入适量DNA溶解液重新水化溶解DNA沉淀,轻弹管壁混匀,可以放置在65℃温育30-60分钟(不要超过一小时),期间不时的轻弹管壁帮助重新水化DNA。也可以在室温或者4℃放置过夜来重新水化DNA。
10.DNA可以存放在2-8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
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