技术原理：主要应用连接酶检测反应 (ligase detection reaction，LDR)技术。即在Taq DNA连接酶的作用下, 当左右两条寡核苷酸探针与目的DNA序列完全互补，并且两条探针之间没有空隙时才能发生连接反应，否则连接反应不能进行，最后通过荧光扫描片段长度，根据测序峰移动的胶位置，通过末端未标记探针的3个碱基差异，确定同一位点的不同基因型，再通过末端未标记探针的7个碱基差异，确定不同位点，最终实现对SNP 位点的精确检测。
原理及流程示意图：
PCR-LDR技术流程：
1. 多重PCR扩增：获得目标位点所在的片断；
2. 多重LDR：得到长度各异的检测产物；
3. 3730测序仪检测：根据测序电泳得到不同的峰值；
4. 判断SNPs结果，数据分析；
方法特点：
1. 通用性强：适用任何多态性位点和各种SNP位点的分型，不需要人工引入酶切位点；
2. 分型准确，检出率高：其准确度可达99.2%以上。
3. 检测快速：LDR技术的最大优点就是实验时间短！与Taqman、RFLP、SSCP和DHPLC相比，由于检测条件更易控制，从DNA样本到数据的产出，整体实验只需要几周。
适宜范围：适宜 100-1000个样品，1-5个位点；
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客户需要提供：
1. 细胞，组织或血液等样品材料，基因组DNA提取费用单独收费；
2. 基因组DNA（体积≥30μl，浓度≥50 ng/μl），纯度 OD260/280 为1.7～1.9之间；
3. 人类基因组需提供SNP位点的RS号。其它物种如牛、鸡、鱼等无rs号的，需提供SNP位点上下游各200bp的确切序列，SNP位点的突变类型，以及位点的上下游25bp内是否存在其它连锁位点。
最终提交结果：
1. SNPs结果（ExceL表格）；
2. 完整实验报告：扩增和反应体系、所涉及的引物、探针序列；
想咨询了解更多关于PCR-LDR连接酶检测SNP分型技术和收费，请电话或邮件联系我们！ service@genenode.com， 18518676727
