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CRISPR/Cas系统核酸检测试纸条

CRISPR/Cas system Nucleic Acid Test Strips

【工作原理】

本产品采用层析式双抗体夹心法快速检测核酸扩增CRISPR/Cas系统酶切产物。用户仅需在探针设计时将一端标记生物素（Biotin），另一端标记异硫氰酸荧光素（FITC）或 6-羧基荧光素（6-FAM）。

测试时，将试纸条插入待检样本。样本中含有的带有标记物的核酸探针首先与胶乳标记的抗核酸标记物抗体结合，随后结合物在毛细效应下向上层析，样本中未被酶切的核酸探针会被固定在C 线与抗核酸标记物配体结合，在质控区（C）会出现一条红色条带，样本中被酶切的核酸探针会被固定在 T 线与二抗结合，在检测区（T）会出现一条红色条带。当样本中所有核酸探针都被酶切后，质控区（C）将不显色。

【预期用途】 

本产品用于检测目的基因RPA、LAMP、PCR扩增后的CRISPR/Cas系统酶切产物，适用于野外现场，快速试纸条检测。

【包装规格/货号】

货号：A4631-50

包装规格：1条/盒×50条，铝箔袋防潮包装。

【储存条件及有效期】

储存条件：存放于避光干燥处，储存温度4~30℃。有效期：12个月。

【操作步骤】

1. 根据检测样品数量取出相应数量的试纸条，并在试纸条上做好标记。每根试纸条只能用于单次、单个样品的检测。

2. RPA、LAMP、PCR扩增后经CRISPR/Cas系统酶切的扩增产物，用带滤芯的吸头取适量扩增产物到新的PCR管中，用超纯水或者稀释液(Tris-HCL 0.05M，pH8.0)稀释5-50倍，根据实际情况选择合适缓冲液，摸索最佳稀释倍数，吹打混匀后进行检测。

3. 在PCR管中将扩增产物稀释到60 uL，将试纸条结合垫端插入PCR管中，液面不高于标示线。

4. 根据试纸条显色情况直接读取检测结果，质控线（C线）显色后2-5min内观察结果，超过5分钟判读无效。

5. 记录检测结果，将试纸条密封丢弃在安全处。

【结果判读】

1. 阳性（+）：

试纸条质控线（C 线）和检测线（T 线）均出现红色条带；试纸条质控线（C 线）不显色，检测线（T 线）出现红色条带。上述两种情况均说明 CRISPR/Cas 可进行有效切割，并激活报告基团显色，结果均可判定为阳性。

注意：当探针浓度过低或没有加入探针时，无论是否酶切，测试结果会显示为阳性，应提高探针浓度再测试。

2. 阴性（-）：

试纸条质控线（C 线）出现一条红色条带，检测线（T 线）不显色，判定为阴性结果。该结果表明 CRISPR/Cas 未能切割报告分子，未能激活报告基团显色。

3. 无效：

试纸条质控线（C 线）和检测线（T 线）均未出现条带，提示所用的试纸条或扩增试剂可能已经损坏、失效或操作有误。

此时，应仔细阅读说明书，重新扩增和检测。如果问题仍然存在，应立即停止使用同一批号的产品，并与厂家联系。

【注意事项及安全提示】

1. 本产品仅供科研使用。使用前请仔细阅读说明书，严格按照说明书操作。违反或者未按说明书进行操作可能导致错误结果。

2. 产品应依照说明书要求，储存于合适的环境和温度下，并在有效期内使用。储存不当或产品过期可能导致错误结果。打开包装后请尽快使用试纸条，以免因试纸条受潮影响试验结果。检测环境光线不足，操作者色弱等因素均可能能导致错误结果。

3. 使用完毕后，应尽快将纸条装进密封袋，妥善处理。本产品为一次性使用产品，请勿重复使用。